用显微镜观察标本时,

1）检查：右手握镜臂,从镜箱内取出显微镜,左手托镜座,轻轻放在实验桌上.先检查一下显微镜各部件有无损坏,如发现有损坏或性能不良者,立即报告教师请求处理.
（2）准备：将显微镜放于前方略偏左侧,必要时使镜筒倾斜（有的显微镜本身已经倾斜）以便观察.转动粗调节钮,将镜筒略升高（或将载物台下降）使物镜与载物台距离略拉开.再旋转物镜转换器,将低倍镜对准载物台*的通光孔（可听到“咔哒”声）.
（3）对光：打开光圈,上升聚光器,双眼同时睁开,以左眼向目镜内观察,同时调节反光镜的方向,直到视野内光线明亮均匀为止.反光镜的平面镜易把其他景物映入视野,一般用凹面镜对光.
（4）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上,标本片的盖片朝上,将标本片放到载物台前方,然后推到物镜下面,用压片夹压住,如有标本移动器,可用上面的弹簧夹夹住标本片,然后把要观察的部分移到通光孔的正*.
（5）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察.一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏.然后,两眼同时睁开,从显微镜侧面注视物镜镜头,同时旋转粗调节钮,使镜筒缓慢下降(或镜台上升),大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时,再用左眼从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调节钮,使镜筒缓缓上升,直至视野中出现物像为止.如物像不太清晰,可转动细调节钮,使物像更加清晰.
如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的).如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台.
如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成：
①转动调节钮太快,超过焦点.应按上述步骤重新调节焦距．
②物镜没有对正,应对正后再观察.
③标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象.
④光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时,易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察.

2．高倍镜的使用方法
（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察.
（2）转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作.
（3）调节焦距：转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)
如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本.如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造成：
①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后,移到视野*,再换高倍镜观察.
②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述步骤操作.
③焦距没调好,应仔细调节焦距.
有的显微镜高倍镜与低倍镜不配套,从低倍镜转换高倍镜时,往往转不过来或撞坏标本,如遇到这种情况,可把镜筒略升高(或载物台下降),直接用高倍镜调焦.
方法是：从侧面注视物镜,调节粗调节钮,使高倍镜头下降至与标本片最短距离,再观察目镜视野,慢慢调节细调节钮,使镜头缓缓上升,直至物像清晰为止.
如需要更换标本片时,应该先把镜筒升高(或载物台下降),然后把标本片移到载物台前方,再取下.

3．油镜的使用
应先调低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下：
（1）先用低干燥系物镜观察标本的概况.
（2）更换高倍干燥系物镜,把所要观察的部分移到视野*.
（3）把镜筒上升约1.5厘米,再把油镜转到工作位置
（4）在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油（或石蜡油）.当使用N.A.＞1.0的浸没系物镜或暗视野斜照明时,在聚光器上也要滴油（一般省去在聚光器上滴油这一步骤）.
（5）细心拧动粗调焦螺旋,使镜筒慢慢下降.这时要仔细观察物镜前端与标本之间的距离,先使物镜前端与油滴接触,然后再慢慢下降镜筒,至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止.这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜（油镜的工作距离约0.2mm）.
（6）眼睛要看目镜中,拧动细调焦螺旋,使镜筒慢慢上升到能看清标本.这步操作要特别注意不要把细调焦螺旋的方向拧错,以防压碎标本.
（7）看清标本后,取下目镜,直接向镜筒中看,把聚光器下的可变光澜关到最小,再慢慢开大,开到它的口径与视场的直径恰好一样大,即使聚光器的镜口率与物镜的镜口率相配合.如果聚光器的镜口率小于物镜的镜口率,则物镜的镜口率就不能充分发挥.
（8）观察完毕后,提升镜筒约1厘米,把油镜转离光轴,及时作清洁工作.先用干的擦镜纸擦一、二次,把大部分油去掉,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后再用干擦镜纸擦一次.擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦.擦拭要细心,动作要轻,不可用力擦.如果聚光器上有滴油也要同样清洁.载波片上的油可用“拉纸法”擦净,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作3—4次,即可干净.（如果是使用石蜡油,清洁时纸用擦镜纸不必沾二甲苯,等到实验一个阶段后,再用二甲苯擦拭.）
（9）把聚光器下降约1厘米,把载物台上的标本移动架移到适当位