trizol法提RNA弄错步骤怎么办我今天提RNA时,忘记将细胞悬液离心,直接往300ul细胞悬液中加1ml trizol,我的细胞培养基是1640+10%FBS,细胞量很少,挺珍贵的,这样会对RNA得率有什么影响?会大大降低得率吗?

问题描述:

trizol法提RNA弄错步骤怎么办
我今天提RNA时,忘记将细胞悬液离心,直接往300ul细胞悬液中加1ml trizol,我的细胞培养基是1640+10%FBS,细胞量很少,挺珍贵的,这样会对RNA得率有什么影响?会大大降低得率吗?

300ul相当于300mg了,1ml的trizol建议原体积控制在100ul左右;你可以先全移到5ml管里,再加1ml trizol,接下来拆成2管抽RNA,这样各步骤的溶液比例不至于偏离太远,最后溶解的时候再合并到一管里提升浓度,基本不会影响结果.