质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢?
问题描述：
质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢?
就算这个可能是鉴定α基因是不是被正确提取,但是为什么与B质粒重组的重组质粒不能鉴定基因是否被正确提取呢?有哪位大侠能详细解答一下吗?
说详细点吧，就是关于“日本血吸虫热激蛋白真核表达重组质粒pVAXI--SjHSP7O的构建”中，其中有两个过程，第一个是：SjHsp70基因与pGEM-T载体的连接、转化与鉴定，第二个是SjHSP70编码基因与pVAXI载体的连接、转化与鉴定。为什么不能直接是SjHSP70编码基因与pVAXI载体的连接、转化与鉴定就解决问题了呢？还要第一个干什么？第一个有什么用呢？听说这是什么T-A克隆，但T-A克隆在这里面又有什么用呢？想详细回答
答
什么基因?什么质粒?
正常情况不用这样做的
一般做表达用的基因片段是需要测序鉴定的
连T载体就是为了去测序,证实你扩增片段没有突变且是你需要的目的片段
然后再去连接你的目的载体就ok了