为什么基因测序前将基因PCR克隆后还要放到大肠杆菌载体上再测序?除了防止PCR产物降解外还有别的原因吗?
问题描述：
为什么基因测序前将基因PCR克隆后还要放到大肠杆菌载体上再测序?
除了防止PCR产物降解外还有别的原因吗?
答
你说的应该是将PCR产物放到质粒上，这样做好处很多，第一，质粒的测序要更容易，而扩增的产物测序相对容易失败，第二，质粒的序列是已知的，你只需要给测序公司提供质粒的类型，他们就可以用自备的通用引物进行测序，而不需要你额外提供引物，而且你可以很多样品都用一个通用引物来测序，只要他们都是放到同一类型的质粒载体上就行，节约不少精力、经费哦。
答
补充一个更重要和实际的考虑：实际测序中，可靠的测序结果往往是从引物后二三十个碱基才开始的。如果片段比较长，超过一次测序能力如七八百之外，即使双向测序也无法获得引物（排除非特异扩增）或紧邻引物处的序列时，就需要克隆到载体再测序。
另外，如果要做后续表达，也必须考虑到引物合成中不可避免的偶发错误，克隆到载体再测序可以清楚的检测。再者，还有比如引入酶切位点，正反向连接等特定实验要求的考虑。
其实我一般都是PCR后直接测序的，因为我多数的实验不做后续表达实验且序列已知。
答
一楼完全没说到重点,二楼正解.你看过测序的结果就知道了,前面的几十个碱基是无法识别的杂峰,最后几百个碱基也是无法识别的杂峰,尽管结果中还是以单个碱基字母的形式给你写出来,但是那是0智商的机器自动记录的,你要人...