镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变.检测这种碱基序列改变必须使用的酶是（　　）A. 解旋酶B. DNA连接酶C. 限制性内切酶D. RNA聚合酶

A、解旋酶是在DNA复制时要用的酶，A错误；
B、DNA连接酶是用来连接目的基因与质粒的工具酶，B错误；
C、根据题意，可用第一种或第二种方法，因此检测过程中必须用到限制性内切酶，C正确；
D、RNA聚合酶是转录过程用的酶，D错误．
故选：C．
答案解析：首先这道题考点是选修本中的基因诊断，所谓的基因诊断就是用放射性同位素（如32P）、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的．而检测样本中是否存在与探针序列互补的同源核酸序列，常用以下方法：
（1）限制性内切酶分析法． 此方法是利用限制性内切酶和特异性DNA探针来检测是否存在基因变异．当待测DNA序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的改变，其特异的限制性酶切片段的状态在电泳迁移率上也会随之改变，借此可作出分析诊断．
（2）DNA限制性片断长度多态性分析． 在人类基因组中，平均约200对碱基可发生一对变异（称为中性突变），中性突变导致个体间核苷酸序列的差异，称为DNA多态性．不少DNA多态性发生在限制性内切酶识别位点上，酶解该DNA片段就会产生长度不同的片断，称为限制性片段长度多态性（RFLP）．RFLR按孟德尔方式遗传，在某一特定家族中，如果某一致病基因与特异的多态性片断紧密连锁，就可用这一多态性片段为一种“遗传标志”，来判断家庭成员或胎儿是否为致病基因的携带者．甲型血友病、囊性纤维病变和苯丙酮尿症等均可借助这一方法得到诊断．
（3）等位基因特异寡核苷酸探针杂交法．遗传疾病的遗传基础是基因序列中发生一种或多种突变．根据已知基因突变位点的核苷酸序列，人工合成两种寡核苷酸探针：一是相应于突变基因碱基序列的寡核苷酸；二是相应于正常基因碱基序的寡核苷酸，用它们分别与受检者DNA进行分子杂交．从而检测受检者基因是否发生突变，以及是否有新的突变类型．
根据题意，可用第一种或第二种方法，因此检测过程中必须用到限制性内切酶．
考试点：基因工程的原理及技术．
知识点：本题主要考查学生对基因诊断与基因治疗等考点的理解．