通过看蛋白质SDS-PAGE还原与非还原条件下的条带,怎样判断它们是单链蛋白还是双链?
问题描述:
通过看蛋白质SDS-PAGE还原与非还原条件下的条带,怎样判断它们是单链蛋白还是双链?
答
蛋白之所以形成双体,是由于两个单体蛋白间通过二硫键的作用形成.跑还原电泳就是通过强还原剂把两个单体蛋白之间的二硫键打开,由此使两个蛋白分开.
判断单体还是双体的方法就是看条带的大小与多少.如果还原与非还原电泳跑出的条带都是同样大小的单一条带,那么该蛋白为单体蛋白.
反之,如果非还原电泳为一条带,而还原电泳为两条带,且这两条带所对应分子量相加等于非还原电泳所对应分子量大小,则为双体蛋白;还有一种情况是该双体蛋白可能由两个相同的单体蛋白组成,那么还原电泳所显示的就是:在非还原电泳对应分子量的一半处具有单一条带.