EGFP的酶切连接方案
问题描述:
EGFP的酶切连接方案
想从pEGFP-N2上的EGFP切下来替换质粒pLM21上的GFP.
EGFP与GFP两端没有相同的酶切位点,请高人相助,如何设计方案.
答
先从pLM21上用相应的酶切下来GFP,然后不要从pEGFP-N2上切下eGFP,而是用PCR扩增出来,扩增的时候使用的引物要设计上pLM21的GFP两端的相应的酶切位点,然后分别纯化基因片段,连接、转化、挑选正确重组子即可.