如果不用PCR技术,而是在目的片段上直接加上"A"这个碱基,然后导入到T载体中,可不可以呢
问题描述:
如果不用PCR技术,而是在目的片段上直接加上"A"这个碱基,然后导入到T载体中,可不可以呢
答
可以的
很多时候你需要使用高保真酶进行扩增,而这类酶缺少在末端加A的功能,所以在PCR反应最后一步72度温育8-10分钟时,加入普通Taq酶进行加A,然后连接T载体