怎样从cDNA文库中扩基因

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• 从CDNA文库和基因组文库中钓出的目的基因有什么不同
• 为什么从基因组文库中提取目的基因和从CDNA文库中提取目的基因可以使用同一种探针?如题,基因组文库含有外显子,也能这么用吗?
• 已知一个基因的mRNA和cDNA,我想克隆此基因,进行转染表达,但是设计的引物无法扩增出目的片段……急求!我目的片段大小为2800,载体为eGFP-N1,设计引物中,我是取了ATG开始的前20个左右的碱基,加入酶切位点和保护碱基,后面是取了去掉终止密码子的互补序列,加入酶切位点和保护碱基……（问题：1、除了酶切位点和保护碱基,还有什么需加入什么吗?2、需要在上游序列中加入KOZAK序列吗?其作用是什么?下游也需要吗?3、酶切位点的保护碱基是特定的吗?4、克隆目的基因,必须从ATG开始设计上游引物,终止密码子设计下游引物吗?可不可以从中间或者两侧设计?因为位置若固定的话很难找到合适的引物）……十分紧急,
• 如何从真核生物cDNA文库中获得未知序列的目的基因
• 下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（　　）①从基因文库中获取目的基因  ②利用PCR技术扩增目的基因  ③反转录法  ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成.A. ①②③④B. ①②③C. ②①④D. ②③
• 基因工程中“获得目的基因”此步具体代表什么?获得目的基因是表示从受体细胞上切割下来得到目的基因（与之并列的还有从基因组文库中直接提取）,还是加上它之后的pcr扩增?另外pcr扩增这步和前两者不是并列关系,为什么也把它列作获取目的基因的方法?从受体细胞上切割下来也是得到大量目的基因是吗?pcr扩增不是仅仅将一段目的基因变成一大堆么?它应该是和从基因组文库中提取是配合完成获得目的基因的,而不是将它们分成两种获得目的基因的方法吧?
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