CTAB 法提取DNA的原理和步骤?
问题描述:
CTAB 法提取DNA的原理和步骤?
答
这个所谓的“满意答案”是无法提出DNA的,第7步水相中的DNA被扔了,建议不要尝试。
答
这是提RNA的吧
答
如果按照这个方法能提出来DNA,我就真的服了。
答
一楼所说步骤有省略,不可轻信,仅供参考而矣。
答
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;
(2)加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;
(3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;
(4)小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min.
(5)重复步骤(4)1-2次,以蛋白层不出现为止;
(6)取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,离心10 min;
(7)弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次;
(8)室温下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用.