实验设计：用大肠杆菌表达来源于动物细胞的某一氧化还原酶；“用大肠杆菌表达来源于动物细胞的某一氧化还原酶；并利用免疫荧光技术对细胞中的该蛋白进行定位.”希望给一个详细点的实验设计,

分类: 作业答案 • 2022-04-11 19:05:47

问题描述：

实验设计：用大肠杆菌表达来源于动物细胞的某一氧化还原酶；
“用大肠杆菌表达来源于动物细胞的某一氧化还原酶；并利用免疫荧光技术对细胞中的该蛋白进行定位.”
希望给一个详细点的实验设计,

答

1.先克隆该酶的cDNA全长,插入可在大肠杆菌内表达的载体进行表达.克隆的时候可以在末端加入标记,比如6-HIS等,以便于表达后的纯化2.在大肠杆菌中表达3.裂解细菌,利用亲和柱纯化蛋白.4.用纯化后的蛋白免疫小鼠（或者兔...