SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用是什么?想知道溶液1的成分及其作用!溶液2,溶液3也想知道!

问题描述:

SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用是什么?
想知道溶液1的成分及其作用!溶液2,溶液3也想知道!

I, 含有EDTA,利于悬浮,可以说是提高得率的一步。有时候也在I中加 RNase,去除细胞中的RNA,一般4°保存。
Ⅱ, 破解细胞的,完了之后一般会变粘稠,这就是遗传物质出来了,
Ⅲ, 是来沉淀蛋白质的

溶液1主要是让菌体细胞充分悬浊于溶液,没有什么实际意义,可以不要。
溶液2是碱液,目的在彻底破坏细胞膜,释放核酸。
溶液3是酸性钾盐溶液,目的是中和碱性并且沉淀SDS同时被沉淀的还有蛋白和大片段线性DNA。
我记得就是这样了,因为没有附加分所以就不去查证了,楼主姑妄听之。

溶液Ⅰ 50mM 葡萄糖 / 10mM EDTA / 25mM Tris-HCl,pH=8.0葡萄糖增稠,使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA 抑制DNase的活性.这一步溶液中还可以加入RNase,不受EDTA影响,并且可以在后续步骤中被除去溶液...