需要将目地片段与细菌连接重组表达.是否应先设计目的基因和细菌的引物?怎麼设计?是否需要知道全序列?

与细菌的质粒连接重组吧?
要将基因表达就把基因连在表达载体上即可
基因的引物是一定要设计的
细菌的引物是什么东西?
引物设计原理就是碱基互补配对 还有DNA聚合酶（Taq酶）需要的反应条件 以及一些注意事项
你这一分不给 实在不想多说没错，是与细菌的质粒连接重组。是否需要细菌的信号肽基因全序列？如果需要怎麼得到信号肽全序列？基因的引物设计是否要先知道全序列？要怎麼设计引物？实在不懂，还请赐教。若真能解决问题，把我现有的分都给你又如何细菌信号肽？？？你发明的么 据我所知 信号肽是蛋白定位用的 定位在细胞器或细胞膜上 至少得酵母那种真核细胞才会有吧不需要知道全序列 需要知道部分序列即可引物设计的话 在目的基因的两端 5‘端到3’端 重叠22bp就行了 另外在5‘端加上你要用的酶切位点看你要连什么载体上了 第一次做的话 连一个T载体就行了 T载体是 PUC18或19 的衍生连T载体不需要设计酶切位点 只要PCR之后用Taq酶加A 即可与T载体连接追加点分就加QQ聊吧 刚好本人就是做这个工作的非常感谢你！对我来说你就是专家啦。我是不太懂这些东西的。我还想问一个问题。目的基因怎麼找？GENBANK找出来一大堆，哪一个才是我需要的，如何判断？你想自己做实验吗。基因网上能查到 去NCBI就可以 要懂英文 加上耐心即可。基因模板就要看你能力了 能找到什么是什么 常见的基因还好说 比如人体的基因 植物的基因等 要是细菌真菌可能麻烦点。比如你想克隆一个人类基因，先查找到基因序列，然后取血液，提取基因组，然后设计引物设计探针做PCR，接着做southern blot 分离模板，然后再PCR，然后纯化PCR产物，然后就可以连在T载体上了，然后再把基因酶切就可以连在其他表达载体上。事先提醒，细菌系统没法完整表达人类等高等动物的基因，或许你要尝试做酵母，方法类似