求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol

问题描述:

求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol
另外,怎么看到有些protocol上没有煮蛋白这一步呢?是放在微波炉里加热就可以么?新手提的问题有些二~

以6孔板的一个孔为例,先把培养液吸出,加入200ul的细胞裂解液,摇床摇15分钟,加loading buffer冰上放置5分钟,用细胞刮把皿底刮几次,然后全部吸出放到离心管里,95°水浴或者金属浴煮10分钟.每个人的方法都不太一样吧,有...