制备感受态的时候,先前的CaCl2重悬细菌,然后再离心,最后在用100-200μlCaCl2重悬细菌,即可用于转化,
问题描述：
制备感受态的时候,先前的CaCl2重悬细菌,然后再离心,最后在用100-200μlCaCl2重悬细菌,即可用于转化,
那么先后两步用CaCl2的目的是否一样?不一样的话分别是什么?还有制备感受态的时候有什么需要特别注意吗?一定要在超净工作台么?
答
目的一样,但两次可以充分达到制备感受态细胞的效果,造成一个低渗的环境.有条件当然需要超净工作台,但一个酒精灯也够了.
注意事项嘛：保持低温；据分子克隆介绍,做好的感受态细胞在4度冰箱过夜可提高转化效率；分装保存在低温冰箱,以后还可以用.