siRNA干扰细胞内蛋白关于免疫荧光的疑问
问题描述：
siRNA干扰细胞内蛋白关于免疫荧光的疑问
我做的是siRNA干扰细胞内的一种蛋白后 利用免疫荧光去检测干扰结果,我想知道干扰后做出来的免疫荧光应该是什么结果?
免疫荧光的照片中是不是干扰后就没有该蛋白的荧光了?我是新手 不懂 急切期望大侠解答!
答
实验里没有这么绝对的事情.
根据实验设计的目的,经过干扰后,检测不到荧光强度这是理想中的结果.但是事实可能达不到.
一方面可能存在干扰不彻底,有部分的RNA仍然存在,并且翻译表达.
另一方面,细胞内在干扰之前本来就可能存在该目标蛋白,蛋白的讲解速度是比RNA慢很多的,所以仍有可能检测到这部分蛋白.