甘油如何冷藏细菌,具体的操作步骤是什么?希望能分条列出来.

1、配制30%（体积分数）的甘油水溶液,离心管若干 灭菌备用.
2、将细菌用富集培养基摇瓶培养过夜,根据保藏要求（有些要求高的项目中菌要达到一定OD值）培养.
3、将菌液和灭菌的甘油水溶液按照2:1的体积比例在离心管中混匀（使最终甘油浓度为10%,其实甘油多点也没关系）,-70°冰箱保存.能将细菌培养液与甘油直接按比例混合吗，这种保存方法能是细菌的转代时间增加到多少，我们用的是嗜酸常温菌，之前的转代周期是20多天，我们培养液的体积有100ml左右，如果我们想按这个量保存的话，好像没有这么大的ep管，谢谢~理论上可以把菌液和甘油直接混合。但实际做起来不方便。因为甘油是很粘稠的，衡量体积不方便，取用也不方便。用水稀释一下就好多了。你为什么要把所有的培养液都保藏起来？保存几管不就行了？虽然没有那么的离心管，但可以用250ml以上 耐高温灭菌的离心瓶代替。建议你小规模的多保藏几管。因为每次取用保藏的菌种，经历冻融过程，会降低存活率。嗜酸菌？是硫杆菌？你是学环境工程的吧？pH小于4 很少有菌可以长，更别说是无机自养的了。你这个菌很好活化纯化的。甘油液氮-70°保藏一般一两年没问题。保险起见，至少每年活化复壮保藏一遍。如果是自养菌，考虑到菌液的菌体密度很低，可以把菌液放到离心瓶里离心，取沉淀加灭菌后的培养基重悬，然后再保藏。这样能保证活菌密度，同时体积也小了。我是搞溶浸采矿的，用的是嗜酸菌，我们的菌液的ph是2。~你以前做过吗，有写过的报告的吗，能给出你以前的报告的实验步骤方案这一步吗？再次谢谢！溶浸采矿方面我不了解。不过想来应该是脱硫工艺那一部分吧？那应该是硫细菌一类的东西了。培养基就用基础盐培养基（可以加点微量元素），具体配方网上很好找。碳源是二氧化碳，因此不用加。只加上适量（每瓶几克就可以了）硫单质作为能源就可以了。这样摇瓶培养，同时监测pH值就行了。当pH值到2了，你就可以离心浓缩保藏了。推荐你离心浓缩一下，因为菌液实际菌体浓度太低了。别担心硫单质也在里面，这不影响保藏的。另外，一些硫细菌是可以用其他状态的硫的，比如硫化钠，亚硫酸钠，硫代硫酸钠等。如果用这些溶于水的硫源，就可避免存在不溶解的硫单质的烦恼。我不做硫细菌，也从来没写过什么报告。课题组的研究内容是保密的。但你可以在网上搜索 硫细菌硫杆菌 的分离培养相关的文章来看，一定会一目了然。你这十分出的太值了，你知道的太多了，到此为止吧。