询问绿色荧光蛋白EGFP-actin标记细胞骨架的具体操作?
问题描述：
询问绿色荧光蛋白EGFP-actin标记细胞骨架的具体操作?
答
回答完,才发现这个问题你肯定提问过.
不知道为什么原来我辛辛苦苦的回答不见了?
要尊重别人的劳动成果.
如果瞬时表达：
将actin基因,放入pEGFP-N1或pEGFP-C1的多克隆酶切位点,注意避免移码突变.
将重组质粒用脂质体法（invitrogen公司的lipofectamine 2000试剂）导入细胞,或用磷酸钙法导入细胞即可.
如果稳定表达,建议用lentivirus vector ,也就是慢病毒载体导入细胞即可.
重组蛋白EGFP-actin在细胞内表达后,自然的混入细胞骨架中,将之标记绿色荧光.