把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?
问题描述：
把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?
质粒酶切位点有BamHI,EcoRI,HindIII,Pstl,Smal,Xbal,Xhoi,目的基因上有BamHI,BgII,Smal,Xmal 等,重组时该选哪个限制性内切酶?怎么设计引物引物?
答
重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在质粒...