反转录时,是不是RNA越多越好?
问题描述：
反转录时,是不是RNA越多越好?
今天我做了两管反转录,RNA的模板量分别为4ul和8ul,想看看它们的区别.当以一个管家基因的引物,以这两管cDNA为模板扩增时,由于疏忽,把两管弄混了.后悔万分.现在只知道这两管PCR产物的电泳图像,有些差别,但不知道哪个是哪个,很郁闷,请高手解疑!
答
博凌科为-为你在RT-PCR说明书上一般会表明使用的RNA量的范围,在这范围内模板量越多,得到的cDNA量越多,如果取1ul做模板,差别不大,你可以尝试将cDNA进行稀释,在用看家基因的引物进行PCR,这样就可以通过电泳条带的明暗来判断之前使用的RNA的模板量.