western blot 时 一般的电流是多少,多长时间、(注我用的是湿转法,目的蛋白大约在40KD左右)
问题描述:
western blot 时 一般的电流是多少,多长时间、(注我用的是湿转法,目的蛋白大约在40KD左右)
答
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间- 我想问一下1、预染marker 是不是不容易转到膜上去啊我做了几回都看不到marker2 如果是普通的marker是不是的把marker剪下来用氨基黑染色啊叩首我用的是预染marker,很好转,你用的是什么膜,NC膜不用激活,PVDF膜要用甲醇激活我用的是PVDF膜 没有marker是不是 转过了的原因啊40KD你配10%,12%300MA90分钟肯定不会转过的,不过40KD我一般1h,我想你应该使用的0.45um的,MARKER 没有印记可能是降解的吧,你上预染4UL要是看不到就换新的试试