切胶回收样品上样时会和溴酚蓝一起漂浮起来,无法电泳检测,是怎么回事呢?
问题描述：
切胶回收样品上样时会和溴酚蓝一起漂浮起来,无法电泳检测,是怎么回事呢?
今天做了一把切胶回收遇到了奇怪的现象：回收后的样品准备跑电泳,但上样时发现样品和上样缓冲液混合物沉不下去,会浮起来,这样就没办法电泳,是怎么回事呢?
我用的TIANGEN的切胶回收试剂盒,回收前电泳上样时150~200uL的PCR产物,洗脱回收液使用的是专门把pH值配到7.8.0之间的去离子水,第一步溶胶液离心时有发现离不下去的现象,但再加一点PN溶胶液也都能离下去,PW漂洗了两次,但漂洗后没有空转离心去除残留的PW.切胶回收样品上样时发现样品会和溴酚蓝一起漂浮起来,无法沉降到胶孔底部,无法进行电泳检测.是什么引起回收样品无法上样的呢?真是怪了.
答
1、Loading Buffer建议用takara配送的,稀释到2X用；
2、回收后的样品里的酒精可能没有去除完全