自己设计了一个实验是从土壤中分离及筛选产纤维素酶菌,结果培养了36小时平板上一个菌也没长出来为什么啊实验器材及药品:选择培养基:KH2PO4 0.5g,MgSO4 0.5g,(NH4)2SO4 5g,CMC-Na 2g,琼脂20g,刚果红(10mg/ml配制灭菌后按1ml CR/200ml培养基加入),PH=自然定容1000ml.高压灭菌锅,摇床,恒温培养箱,500ml三角瓶,培养皿,移液枪及枪头,试管及试管架,酒精灯等.1、在底物富集的地方(土下10cm)采土样20g于三角瓶中加水后放入摇床中摇40min.2、将培养基及刚果红(CR)溶液配制好后和枪头,培养皿、各装有10ml水的试管放入灭菌锅中121℃下灭菌 20min.3、将CR溶液倒入培养基中后再倒平板.4、用移液枪将土样吸取0.2ml菌悬液到无菌水中,一次梯度稀释到10-1 —10-7 .5、涂布10-4—10-7的菌悬液后37℃下培养24h.....因为一些原因导致 氮源用硫酸铵,是否需要用有机氮混合搭配?PH搞忘调了,悲剧啊 原本想的
问题描述:
自己设计了一个实验是从土壤中分离及筛选产纤维素酶菌,结果培养了36小时平板上一个菌也没长出来为什么啊
实验器材及药品:
选择培养基:KH2PO4 0.5g,MgSO4 0.5g,(NH4)2SO4 5g,CMC-Na 2g,琼脂20g,
刚果红(10mg/ml配制灭菌后按1ml CR/200ml培养基加入),PH=自然
定容1000ml.
高压灭菌锅,摇床,恒温培养箱,500ml三角瓶,培养皿,移液枪及枪头,试管及试管架,酒精灯等.
1、在底物富集的地方(土下10cm)采土样20g于三角瓶中加水后放入摇床中摇40min.
2、将培养基及刚果红(CR)溶液配制好后和枪头,培养皿、各装有10ml水的试管放入灭菌锅中121℃下灭菌 20min.
3、将CR溶液倒入培养基中后再倒平板.
4、用移液枪将土样吸取0.2ml菌悬液到无菌水中,一次梯度稀释到10-1 —10-7 .
5、涂布10-4—10-7的菌悬液后37℃下培养24h.
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因为一些原因导致 氮源用硫酸铵,是否需要用有机氮混合搭配?
PH搞忘调了,悲剧啊 原本想的是7 可0.几的盐能改变PH吗
刚果红溶液是培养前加入的 是否是待菌长出来后再加啊?
培养温度正确吗?
答
确实,同楼上所讲,你的培养基里面没有碳源,细菌是没法生长的。
答
明显有CMC-Na啊,是碳源哦!你们搞什么?
答
you know!因为要想筛选出纤维素酶菌,是依靠纤维素酶菌能靠纤维素酶分解纤维素来提供自生能量的,所以你的实验的要加纤维素来作唯一能量源!而你的实验中没有能量源,刚果只是仅仅够检测,筛选