细胞培养用的胰蛋白酶自己配置和买的试剂有什么区别?一般0.25%胰蛋白酶的用量是多少?胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含钙镁、含酚红)胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含钙镁)胰蛋白酶消化液(0.25%,不含EDTA)有什么不同?

问题描述:

细胞培养用的胰蛋白酶自己配置和买的试剂有什么区别?一般0.25%胰蛋白酶的用量是多少?
胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含钙镁、含酚红)
胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含钙镁)
胰蛋白酶消化液(0.25%,不含EDTA)
有什么不同?

1跟2、3的区别:酚红,主要做指示剂用的,用来调节其PH,通过颜色可以观察出,一般动物细胞传代用的胰酶PH值在7.7.4之间.
1、2跟3的区别:主要体现在EDTA上面,动物细胞表面很多和培养皿结合的蛋白都是带有钙或者镁离子的蛋白,EDTA对钙镁离子有很好的螯合作用,这样就可以更好的辅助胰酶降解相应的蛋白质,在消化效率上,会有很好提高,至于不含钙镁离子,这个,想想就知道了,溶液中含钙镁肯定会减弱其胰酶的活性的.