如何通过实验验证所研究的一个蛋白质A在大肠杆菌中是否获得了表达?前辈,再问一道.
问题描述：
如何通过实验验证所研究的一个蛋白质A在大肠杆菌中是否获得了表达?
前辈,再问一道.
答
最基本和常用的简单廉价方法
1.首先 你要知道这个A蛋白的分子量.
2. 按照正常的基因工程方法做好重组表达质粒,对其进行（诱导）过表达,用宿主菌株作为对照.
3.对2种不同的菌株进行分别发酵培养后,按照常规,离心取菌、破碎细胞、提取全蛋白、进行PAGE 电泳（加上适宜分子量范围的蛋白质标准,marker）,对比2种细菌的PAGE结果,检查在A分子量位置处 过表达菌株是否有粗带形成,若有说明表达了,否则跟对照菌株一样的话,则说明未表达.