CTAB法提取DNA的问题.最后加入TE溶解DNA,有一块棕红色沉淀溶解不了,那是什么,会影响DNA质量吗?另外有必要做电泳检测吗?大部分经TE溶解后都是澄清的,少部分就会有一块棕红色沉淀溶解不了,这是什么物质?怎么避免?另外如果电泳检测没有带的话是不是一定就不能用来跑PCR,需要重提了?
问题描述:
CTAB法提取DNA的问题.
最后加入TE溶解DNA,有一块棕红色沉淀溶解不了,那是什么,会影响DNA质量吗?
另外有必要做电泳检测吗?
大部分经TE溶解后都是澄清的,少部分就会有一块棕红色沉淀溶解不了,这是什么物质?怎么避免?另外如果电泳检测没有带的话是不是一定就不能用来跑PCR,需要重提了?
答
前面的步骤没有操作好,要么是你的样品比较特殊,含有较多的色素或脂肪,先用电泳检测一下,如果条带清楚就可以用,如果混乱要修改实验设计.
不知道你提的是动物还是植物的DNA,估计可能是植物色素或者是叶片的蜡质层,甚至可能是药品本身变质发生反应造成的.
提DNA要多做几个重复,逐个排查问题,当然最终的结果是电泳检测结果说了算的.如果检测条带不清楚一般重提一次,如果仍然不清楚那么就要修改方法了.条带清楚到什么程度就可以用是根据你实验的要求定的,比如做ISSR或者RAPD对条带要求就低一点,做SSR要求就要高些.