SDS-Page电泳,我配的胶总是不凝固

那聚丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺 浓度是多少,会不会是它的问题.聚丙烯酰胺 浓度是 29%甲叉双丙烯酰胺 浓度是 1%是现配的TRIS-HCL是1M的，PH 8.9那没问题啊，你配得聚丙烯酰胺 甲叉双丙烯酰胺 有过滤吗？我们的都是避光过滤避光保存的。过滤了，0.50um膜过滤的。棕色瓶子，4°冰箱保存。acr-bis不太好溶，搅拌了十分钟，还是有一点点白色杂质溶不了。搅拌过程中感觉烧杯变得很冰凉。这正常吗？acr和bis都是进口试剂，保质期内，才开封的，固体室温保存。会不会是这个试剂我配得有问题啊？其他试剂，缓冲液PH确认是8.8没错。过硫酸铵是现称现配的，溶解的时候有噼里啪啦的响声。TEMED才买的。我觉得也许就是acr-bis的问题了下边是我们实验室的配方，分离胶大约半个小时凝固，浓缩胶更快。以供参考。(1) 4×积层胶缓冲液： Tris-Cl 6.06 g10％(W/V)SDS 4 ml去离子水溶解定容至100 ml ，用盐酸调至pH 6.8。(2) 4×分离胶缓冲液：Tris-C118.17 g 10％SDS4 ml去离子水溶解定容至100 ml，用盐酸调至pH 8.8。（3）30％聚丙烯酰胺溶液（30%AC）：丙烯酰胺 29 g双丙烯酰胺(N，N’-甲叉双丙烯酰胺) l g去离子水溶解并定容至100 ml，滤去不溶物，装入棕色瓶于4℃ 保存。（4）10％过硫酸铵（AP）：称取1克过硫酸铵溶于9ml双蒸水，定容至10ml，分装冻存备用。配制：A: 12.5％分离胶双蒸水 1.62 ml30%AC 1.95 ml4×分离胶缓冲液 1.24 ml10%AP 40μlTEMED 4μl混匀灌制。B: 5%浓缩胶双蒸水 1 ml30%AC 300 μl4×浓缩胶胶缓冲液 445 μl10%AP 30 μlTEMED 5 μl混匀灌制。