动物细胞融合的方法
问题描述:
动物细胞融合的方法
除了PEG,点激,离心.还有啥?还有……动物细胞培养的培养基是?和植物培养培养基两者物理性质的差异?
答
还有:震动,病毒.
诱导细胞融合的方法有三种:生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(离心,震动,电刺激).某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合.化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变,去掉作用因素之后,质膜恢复原有的有序结构,在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合.
培养基的差异:动物细胞的培养基是液体培养基、血清培养基,而植物培养基是固体培养基.
以下是动物培养基和植物培养基的具体内容:
动物培养基:
1.动物细胞培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等.动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清,因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育.
2.动物细胞培养液的特点:液体培养基、含动物血清.
植物培养基:
( 1 )愈伤组织诱导培养基:MS 培养基(蔗糖含量为 10 g/L ,2,4 – D 含量为 2 mg/L ,琼脂 10 g/L ).
( 2 )试验培养基:在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA .
吲哚乙酸(IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解,6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中.
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