果蝇基因组DNA提取,乙醇沉淀后大量盐析出,为什么呢?
问题描述：
果蝇基因组DNA提取,乙醇沉淀后大量盐析出,为什么呢?
10只果蝇基因组提取得到的300ul上清液（基因组粗提物溶于100mM TrisHCl,50mM NaCl,100mMEDTA,1%SDS后热处理再离心）,过了两遍酚氯仿异戊醇后,再过氯仿.取上清,加入0.1体积3M NaAc和2.5体积无水乙醇,液体整个立即呈现大量云雾状,-20度冻半小时离心,得到的沉淀多的吓人,用枪头捅一下沉淀后感觉像是很多盐颗粒.
答
太正常了,你DNA溶液里加了高盐,又在低温下用醇沉淀,盐肯定跟着DNA一起沉下来.
没什么问题,把沉淀用70%乙醇洗涤除盐,再离心去上清.此时的沉淀晾干后用水溶就可以了.
看样子你是新手,抽提DNA的经典步骤上都有用70%乙醇洗涤DNA沉淀这一部的.但是洗不掉，盐太多了DNA沉淀溶解后测OD260/OD280，看看是否有蛋白污染。