怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
问题描述：
怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
答
转录因子包含DNA binding domain (BD)和activation domain (AD),而且不同转录因子的BD和AD是可以互换而不影响转录激活的.你想证明是activation domain,就融合到一个已知转录因子的BD里,常用的就比如Gal4,LexA的BD,然后去检测reporter gene的转录情况.如果有转录发生,则转录因子完整,如果没有检测到转录,则转录因子不完整,缺AD,那么你想证明的蛋白就不是AD.