PCR Buffer里面的镁离子浓度多少,买的时候是分装的,怎么配,还是不用先混?
问题描述:
PCR Buffer里面的镁离子浓度多少,买的时候是分装的,怎么配,还是不用先混?
答
说明书上应该写得很清楚.
一般买来分装的PCR酶和BUFFER,如果用的次数不多,可以当时用,当时混合;
如果经常使用,可以在使用前,先将BUFFER混合起来,即将镁离子、dNTP等混合起来,酶除外.酶当场加会比较好,可以将酶分装,减少冻融次数.
最后,还是提醒一下,以说明书使用方法为准~买来的时候里面有酶 、BUFFER 和Mg离子三管,说明书上没说怎么配,Buffeer和Mg离子都是满管酶的话,肯定会写每次用多少U,你自己算算BUFFER上的应该也会写是多少×的,N×就稀释N倍镁离子肯定有初始浓度,参照说明书上的终浓度,自己计算稀释,如果说明书上没写,一般终浓度以20mM效果最好