定量PCR法中,Taqman探针法需要做溶解曲线吗?为什么?
问题描述：
定量PCR法中,Taqman探针法需要做溶解曲线吗?为什么?
答
正常情况下是不需要的,溶解曲线是在SYBR Green法中利用染料在DNA解链时释放不发射荧光,而在DNA双链时与其结合发射荧光的原理制作溶解曲线的,而Taqman探针在PCR反应时其寡核苷酸链由于被DNA聚合酶的外切酶活性给切断,所以不能重新再结合故不能形成探针,所以不需要做溶解曲线.再一个,溶解曲线只是为反应体系中判断是否有非特异性扩增提供一个侧面的依据,适用于染料法.而探针法的特异性很高,从这方面来看也是不需要的.