mRNA反转录形成cDNA 大致分为哪些步骤?
问题描述:
mRNA反转录形成cDNA 大致分为哪些步骤?
大致便可,谢啦..
答
先从细胞提取总RNA,然后根据大多数真核mRNA含有多聚腺嘌呤(polyadenylic acid ,polyA)尾的特点,用寡聚dT纤维素柱将mRNA分离出,以mRNA为模板,在多聚A尾上结合12-18个dT的寡聚dT片段,作为合适的起始引物,在逆转录酶作用下合成