如何配制50mM磷酸钠缓冲液（pH7.0）网上查到的：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml.B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水,定溶100ml.取A液39ml与B 液61ml混合,定容至400ml,调PH至7.0.但是,我自己的方案没有定容至400ml,这样我配的试剂对吗?最好给出计算公式：ph=pka+lg[c(磷酸钠）/c(磷酸氢二钠)],
问题描述：
如何配制50mM磷酸钠缓冲液（pH7.0）
网上查到的：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml.B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水,定溶100ml.取A液39ml与B 液61ml混合,定容至400ml,调PH至7.0.但是,我自己的方案没有定容至400ml,这样我配的试剂对吗?最好给出计算公式：ph=pka+lg[c(磷酸钠）/c(磷酸氢二钠)],
答
现在基本不用你那个ph=pka+lg[c(磷酸钠）/c(磷酸氢二钠)],公式了,你那个网上查到的方法是正确的,A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml. B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水,定溶100ml.
这样得到的是200mM的磷酸钠缓冲液.而A液与B液以39：61的比例混合,得到PH值为7.0的溶液.
但浓度还是200mM.所以得到的100ml稀释成400ml.刚好是你要的.你如果没法定溶到400ml.你可以计算一个你可以定溶的体积,比如1L.总共是50mmol（0.05Mol）试剂,NaH2PO4.2H2O占39%得0.05*0.39*分子量.同样可以算出Na2HPO4.12H2O（0.05*0.61*分子量）要的量.
变通一下就OK了.