用无水丙酮和无水乙醇混合(2:1)测定叶绿素,在400-700nm测吸光度,请问我如何计算叶

问题描述:

用无水丙酮和无水乙醇混合(2:1)测定叶绿素,在400-700nm测吸光度,请问我如何计算叶

我也提叶绿素,不过我用80%的丙酮来提.\x05
均匀称取蔬菜样品10.0g放入研钵内,加入少许玻璃砂(约0.5-1g)充分研磨为细浆后倒入50ml容量瓶,然后用丙酮分几次洗涤研钵并倒至入容量瓶内,用丙酮定容至50ml,充分摇均后,用滤纸过滤,取滤液用分光光度计于645和663毫微米波长下测定并计录其光密度,以80%的丙酮用作空白对照,按照下列公式计算组织中的叶绿素a和b和总叶绿素的含量.
D-表示在所指的波长下,叶绿素提取液的光密度读数
V-叶绿素丙酮提取液的最终体积(ml)
W-测定所用组织鲜重(g)
\x05如果只要求测定总叶绿素的含量,则只测定溶液的652毫微米波长的光密度,其含量按下式计算:
\x05
\x05D-表示在所指的波长下,叶绿素提取液的光密度读数
\x05V-是叶绿素丙酮提取液的最终体积(ml)
\x05W-测定所用组织鲜重(g)
\x05所计算出的叶绿素单位为mg/g鲜重,这一单位有时太大,使用不方便,即乘1000倍,变为ug/g鲜重为单位.
\x05在提取绿叶素中最后的丙酮浓度应为81%,所用材料为菠菜,含水量极高,10g样品可视作10ml水故研磨后定容至50ml,丙酮最终含量为80%.
但是不知道你所用的这个比例适不适合用这个公式