我是克隆一个未知的基因,首先拿到了大概1200BP的中间保守区,然后做3' 5'RACE,因为这个基因相近物种中

问题描述:

我是克隆一个未知的基因,首先拿到了大概1200BP的中间保守区,然后做3' 5'RACE,因为这个基因相近物种中
我是克隆一个未知的基因,首先拿到了大概1200BP的中间保守区,然后做3' 5'RACE,因为这个基因相近物种中还没有确切的公布,只有预测的,并且还长短不一,我也不知道3'端该有多长,5'端又该有多长.做RACE出现的条带有一大堆.我最终是想做表达看能不能表达的,这样子不用纠结3'端和5'端是不是走到头了对吗?因为这个基因CDS也就一千多点,编码的蛋白也就五百多个氨基酸.有谁能给我建议建议,没分了,求不吝赐教.

其实3‘段还是好确定的,因为有POL A尾巴,有就倒头了啊,3’段的长度可以跨POL A设计引物就差不多的,长度出来后再确定5‘段也就容易了