sds-page电泳出现问题做肌肉蛋白SDS-PAGE电泳,跑出来的泳带模糊不清且有拖尾的现象,原本应该显示的泳带没有显示出来,或者显示出模糊的一块.只有一条或两条带比较清晰,其他的都模模糊糊.另外考马斯亮蓝染色液如何配制才能取得更好的染色效果(CBB-R250固体)?脱色的时候为何背景颜色不能完全褪色?回答请具体点不要复制黏贴貌似我说的不是很明白。哪位做过大鼠肌肉蛋白SDS-PAGE电泳的能否具体说一下方法,特别是点样的时候,我加的是DTT,上样20UL,跑到最后就是跑出3条带。其他的都没跑出来。郁闷。谁帮忙我再加200分。
问题描述:
sds-page电泳出现问题
做肌肉蛋白SDS-PAGE电泳,跑出来的泳带模糊不清且有拖尾的现象,原本应该显示的泳带没有显示出来,或者显示出模糊的一块.只有一条或两条带比较清晰,其他的都模模糊糊.另外考马斯亮蓝染色液如何配制才能取得更好的染色效果(CBB-R250固体)?脱色的时候为何背景颜色不能完全褪色?
回答请具体点不要复制黏贴
貌似我说的不是很明白。哪位做过大鼠肌肉蛋白SDS-PAGE电泳的能否具体说一下方法,特别是点样的时候,我加的是DTT,上样20UL,跑到最后就是跑出3条带。其他的都没跑出来。郁闷。谁帮忙我再加200分。
答
1. 上样量不能太多
2. 点样孔要清洁,样品要沉到底部形成一条带
3. 浓缩胶低电压跑
4. marker如果染得很好,染料就没问题。
5. 脱色液配方及配置时间如何?如果时间长,会挥发。脱色时可稍加热。应该 能脱干净。
答
考马斯亮蓝配溶液要用滤纸滤一下
在就是蛋白材料是不是有问题啊,只有三条带。重新做一下材料试试
答
先把图发上来看看.要不不好给你分析
答
这么深奥的问题..你不应该来知道问...
建议你去找些专家问吧
答
电泳的那个问题是不是你点DNA液的时候没点好,要么就是通电的电压没调好
脱色没完全退色是正常的,看的清楚就可以了……
补充:
那就有可能你的DNA没提的很纯,电泳分离不开来……再做遍吧,我跑过兔子跟河蚌的……应该是这个问题
答
跑出来有拖带现象,那就是你的蛋白质杂了。
跑出的条带不明显的话应该是你提取的肌肉蛋白的浓度太低了,或者染色时间不够。