考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线不过原点怎么办

问题描述:

考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线不过原点怎么办
以牛血清白蛋白(BSA)为标准蛋白质.称50mg考马斯亮蓝G-250溶于25mL 95%乙醇和50 mL 85%(w/v)的磷酸混合液中,用蒸馏水定容至500mL,快速滤纸过滤后储存于棕色瓶中备用.  称取100mg BSA,溶于蒸馏水中,定容至100mL,则其浓度为1000μg/mL.按表在6支具塞试管中分别加入BSA溶液和蒸馏水,配制成0~100μg/ml牛血清蛋白溶液各1ml,混匀后加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液,盖塞、混匀,室温静置2min,用分光光度计在595nm处检测吸光

用标准加入法,必过原点.
酸和水混合后,最好多静置一会,要不测出来的数值会不稳定.