为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度?

问题描述:

为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度?

Tm指的是把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度.我们PCR时候,当然不能用Tm值来作为退火的温度.一般来说,退火温度比Tm值要低上5度左右.但是这个也不是绝对的.建议你如果说模板比较充足的话,做一个梯度试验.范围在Tm值周...