western blot中蛋白样品浓度怎样稀释?用PBS稀释吗?
问题描述：
western blot中蛋白样品浓度怎样稀释?用PBS稀释吗?
如果说每孔加入50ug,上样量25ul,那么是不是把蛋白稀释成2.4ug/ul,然后在加入6*loadingbuffer变成2.0ug/ul蛋白?
答
计算出样品及buffer的体积,加水补足到25ul那我能不能先把浓度确定了，然后加等体积的样？如果可以，用什么来稀释蛋白？我的意思是：根据你的蛋白样品的浓度以及上样克数计算出你需要的样品体积，根据上样总体积算出buffer的体积，剩下的用去离子水补足就可以了。如果你加buffer制出来的样品不是一次用完的话，就用蛋白样品的溶剂稀释。