临床上用醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的原理是什么?可将其分为哪几种成分?
问题描述:
临床上用醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的原理是什么?可将其分为哪几种成分?
答
一、原理
醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维素薄膜作为支持物的电泳方法.带电颗粒在电场力作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳.由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中,则蛋白质将带正电荷而向负极移动.反之,则向正极移动.因为蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关,所以,可用电泳法将不同的蛋白质分离开来.血清中含有多种蛋白质,它们的等电点都在pH 7.5以下.将血清放于pH 8.6的缓冲液电泳时,所有的血清蛋白都带有负电荷,在电场中将向正极移动.由于各种血清蛋白在相同pH时所带电荷数量不等,分子颗粒大小不一,因而泳动速度不同,经电泳被分离开来.血清蛋白质的等电点和分子量.
从前端至点样处的方向分别为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白.
本实验以醋酸纤维素薄膜(简称CAM)为支持物分离血清中的不同蛋白质.它是一种良好的呈均一泡沫状疏松薄膜,厚约120μm具有一定的吸水性.