如何从大肠杆菌中提取染色体DNA
问题描述：
如何从大肠杆菌中提取染色体DNA
答
细菌基因组的提取在一般的分子生化实验书都能找到。
大体上步骤是：1：收菌，6000rpm,5min.PBS洗三次
2，控干PBS加TE 567ul,混匀，加入30 ul的10%的SDS，混匀后加入3ul 20mM的蛋白酶K，37℃水浴1 h.
3: 加入100 ul的5M Nacl,混匀，加入80ul的TBST/Nacl，65℃ 水浴10min.
4:加入等体积的氯仿：异戊醇（24:1），混匀，13000rpm,5min.
5:小心取上清，注意不要吸出界面物质。然后加入等体积的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1），离心13000rpm,5min.
6:吸出上清，加入60%体积的异丙醇，颠倒混匀，直到出现絮状沉淀。
7：离心13000rpm,2min
8:用70%的乙醇洗一遍，一般加1 ml
9:控干乙醇，用50-100ul的TE溶解沉淀即可。
答
大肠杆菌中染色体DNA的抽提(1)大肠杆菌一级瓶培养过夜,以10%的接种量接二级瓶培养4～5小时后,培养物以50ml/管离心收获(8 000 rpm,5min,4℃).(2)菌体沉淀中加入10ml BufferA,旋涡振荡混匀,37℃保温30分钟.(3)取出后加...