请问各位大虾,PCR时,72℃延伸1min,能延伸多少碱基对?扩增1300bp的长度,一分钟够吗?
问题描述:
请问各位大虾,PCR时,72℃延伸1min,能延伸多少碱基对?扩增1300bp的长度,一分钟够吗?
答
延伸时间取决于目的片段的长度和所使用的DNA聚合酶的催化效率.按最常用的Taq酶看,其催化效率约为1200bp/min.扩增1300bp的片段,1分钟不够.如果留点余量的话,可设置为80秒.