退火的温度选择决定于引物的碱基序列?
问题描述:
退火的温度选择决定于引物的碱基序列?
A 引物序列越长 退火温度越低
B 引物序列越短 退火温度越低
C 引物中C G 含量越高 退火温度越高
D 引物中A T 含量越低 退火温度越低
选择是A
退火就是复性 我想请问一下退火温度和引物序列为什么会有关系
也就是说退火到底是做什么 为什么序列会影响温度
这些我看到了 我想知道那些没有写的
就是温度高低如何影响配对效率 为什么C-G对多的话温度应该低
二楼的 跟你说的刚好相反...莫非答案是选择错误的一项么...如果是题错了的话那我就理解了...
答
退火指的是是在高温下分开的DNA的两条单链,在减低温度后重新结合成为双链的过程.
退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长度.对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想.引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度:
Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)
复性温度=Tm值-(5~10℃)
因为退火是A-T、C-G配对、形成氢键的过程,因此温度的高低会影响配对的效率.
C-G的键能高,因此存在较多的C-G的话,要在较高温度下就能使得两个单链结合为双链,也就是退火.
PS:个人认为答案应该是C.A是错误的.引物越短退火温度越低.
B一般来说是正确的,但还是受到CG含量的影响.
综上,我觉得是题目和所给的答案对不上.