在已有菌落的培养基上倒新的培养基时怎样不冲散菌落

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• 大肠杆菌培养及计数在对培养的大肠杆菌进行活菌计数时,发现琼脂表面有乳白色微偏暗的直径约4~5mm的菌落,琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落,而琼脂内的菌落却只有约1mm直径,请问琼脂内的菌落是大肠杆菌菌落吗?如果是大肠杆菌,为什么一个平皿内的相同菌会形态不一样?注：1.试验环境为无菌环境,操作均严格按照无菌操作进行.2.培养的过程：冻干菌株——复苏——营养肉汤培养（37摄氏度摇床,约18小时）——营养肉汁琼脂培养基平皿画线培养（37摄氏度隔水恒温培养箱,约24小时）——（挑取单个菌落）营养肉汁琼脂斜面培养基培养（37摄氏度隔水恒温培养箱,约24小时）——活菌计数实验（培养：37摄氏度隔水恒温培养箱,约48小时）补充：实验是在专门的无菌室的无菌操作台做的，所有器材、试剂、培养基等也都已经过高压灭菌。活菌计数所使用的是用稀释液从前面的斜面培养基上洗下的菌悬液。菌悬液经稀释至10的-8次方后选择了-6、-7、-8三个稀释度的悬液各1ml，分别倒入平皿中，而后倒入40~45摄氏度
• （2009•安徽）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
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• 某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）（　　） A.2.34108 B.2.34109 C.234 D.23.4
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