蛋白质再跑SDS-PAGE时是分子量小的在下面,在过凝胶色谱时分子量小的最后流出来,这是为什么啊?
问题描述：
蛋白质再跑SDS-PAGE时是分子量小的在下面,在过凝胶色谱时分子量小的最后流出来,这是为什么啊?
这两个原理我都看了,一下就把我搞糊涂了!我想知道一个蛋白质加了糖链之后,分别经过SDS-PAGE,跟凝胶色谱之后,跟原理的蛋白质的关系?
答
我觉得是和分子筛的孔径大小有关~~~ SDS-PAGE的孔径较大~~ 所以不管是什么分子量的都经孔径走~~所以最后大的蛋白被滞留在后面~~~ 而凝胶色谱的孔径较小~~~ 质量大的蛋白不经过孔径走而是从孔径的间隙走 ...是不是这样的：：：SDS-PAGE得到的结果是 不同分子量蛋白质之间的迁移距离，所以分子量小的蛋白质跑的快些。凝胶色谱得到的结果是 蛋白质和盐类等小分子物质之间的迁移距离，所以小分子物质与蛋白质相比，距离远就慢些。蛋白质和蛋白质之间的差异不是十分显著~呃~~~不是的两者都是蛋白质的分子量决定的~~~~ SDS-PAGE是由于蛋白质经过孔径时的阻力大小决定~~~ 质量大的阻力大所以慢～～～ 而凝胶色谱是根据蛋白质走过的路程来决定的 质量大的可以不走孔隙而走凝胶颗粒之间的部分 所以会使得路程短而快速的出来～～～～