流式细胞仪荧光强度太强了怎么办啊?
问题描述：
流式细胞仪荧光强度太强了怎么办啊?
我做的是巨噬细胞RAW264.7,用流式细胞仪测定吞噬功能,使用了一种绿色荧光微球,结果微球的荧光强度太强了,和细胞本底的荧光强度相差4个数量级以上,没办法显示在同一个图上,有什么解决办法?
我试过减少细胞数量和微球数量,都没办法使其显示在同一个直方图上.
答
不知道你的机器可不可以加滤镜.建议加至少为2的condense filter,由于filter对光的衰减是按照比例来的,所以越强的光衰减越多,可以把极强的信号拉回坐标内
还有就是降低PMT,使空白对照尽量向左边压缩.然后打开X坐标的Biexponential display,这样就可以把压缩的图像拉开了.