从人血液中分离淋巴细胞 用天津血研所的淋巴细胞分离液
问题描述:
从人血液中分离淋巴细胞 用天津血研所的淋巴细胞分离液
我从浓缩白细胞中分离淋巴细胞,将血液用生理盐水等量稀释以后,先加了淋巴细胞分离液,再加血液,我所加比例为1:2,2000r/min 应该上层为血浆,中间层为淋巴细胞分离液,下层为红细胞,在上层和中间层界面处有一层白色雾区.但是我按照我的方法做下来,有中间层也就是淋巴细胞分离液层,但分离液层混有红细胞,所以白色雾区和分离液的红细胞靠在一起,吸取白细胞时很容易将红细胞吸上来,导致实验不理想,我想问问高手这主要是什么原因造成的呀?
答
几个解决办法
将血液稀释程度再提高一点,并且充分吹打,有时吹打不均匀会导致血凝块影响分离效果;
向淋巴细胞分离液加的时候注意保持液面平整,不要加太快导致液面相混;
离心转速提高一点点,你说的是转速,不知道用的什么离心机,离心力是不是够,把转速提高到2500试试看?
最后如果还是不行,可能就是分离液不太好了,直接换了吧!
我一直用的是进口的GE的l淋巴细胞分离液,偶尔也会出现红细胞分离不好,但是比率较小,与所提取的血样也有关系(有些重症病人的血样特别容易出现分离不好的情况)
所以,做实验省钱不是硬道理,出结果才是.