高效液相洗柱子时一般需注意什么?一般用甲醇和水按一定比例混合后先洗之后然后用纯甲醇再洗,是不是?

问题描述:

高效液相洗柱子时一般需注意什么?一般用甲醇和水按一定比例混合后先洗之后然后用纯甲醇再洗,是不是?

我常用的方法:
1、95%水-5%甲醇冲洗30-60min,
2、纯甲醇冲洗30-60min.
流速一般是1ml/min.如果流动相里没有缓冲盐的话是不是就直接可以用纯甲醇洗?记得当初药监局的人来我们单位时说洗柱子时流速放低点冲半个到一个小时,既节约试剂又冲洗的彻底,所以我们放的流速是0.5ml/min,每天早晨还用不用再冲洗柱子?还是说可以直接将滤头放入流动相里走基线?1、没用缓冲盐的话可以直接纯甲醇2、流速的话,我还真没这么用过0.5,得感谢你让我学了一招,哈哈。我回去试一试。3、每天第一次用机器的话需要冲一下柱子,我上一天虽然用甲醇冲得很平但是第二天来冲还是会冲出一些东西,保险起见还是甲醇冲一下吧,应该很快,大约15min。完了再平衡流动相。