连接酶能粘合单链DNA吗
问题描述:
连接酶能粘合单链DNA吗
答
这个问题挺不错的,理论上可以,但事实上很难实现.
DNA连接酶的作用是生成3,5-磷酸二酯键,因此存在这粘合单链的可能.但事实上,连接酶只能连接空间距离非常近的DNA末端,在构建的时候,有粘末端的序列会先通过氢键的作用使DNA序列相连接,形成有两个断点的DNA双链,之后连接酶再连接3‘和5‘.而且DNA双链好像还有帮助与连接酶结合的作用.所以粘末端序列可以连接,但单链,我觉得也只是存在理论上的可能.
补充一点,DNA聚合酶(我们常指的是真核生物中的PolyII),当以全酶形式存在的时候同样具有形成磷酸二酯键的功能,复制过程中,先合成较短的DNA单链(冈崎片段),结合到模版上,之后聚合酶补上空余的碱基,形成磷酸二酯键,完成复制过程.